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Espectrofluorímetro

Responsable

Dra. Marcia Arroyo

 

Principio de la técnica

La espectrometría de fluorescencia (también llamada fluorometría o espectrofluorimetría) es un tipo de espectroscopia electromagnética que analiza la fluorescencia de una muestra. Cuando una sustancia química absorbe un tipo de radiación, sus electrones pasan de un estado basal a un estado electrónico excitado. Al suceder el fenómeno de absorción muchas sustancias disipan el exceso de energía en forma de calor, sin embargo, solo un grupo de especies pierde una cantidad del exceso de energía en forma de calor, y emite la energía restante en forma de radiación electromagnética de mayor longitud de onda que la absorbida. En este caso se utiliza un haz de luz, por lo general luz ultravioleta, que excita los electrones de las moléculas de ciertos compuestos y provoca que emitan luz de una menor energía, generalmente luz visible (aunque no necesariamente). La emisión de fluorescencia tiene lugar en nanosegundos y durante este período de tiempo suceden numerosos procesos moleculares (interacciones proteína-ligando, desplazamiento de biomoléculas, fenómenos de hidratación, etc.) que pueden inducir modificaciones en alguna de las propiedades de los compuestos fluorescentes (espectros, vidas medias, rendimiento cuántico, anisotropía de fluorescencia, etc.). Estas modificaciones pueden ser medidas dando información sobre dichos procesos moleculares.

 

Instrumental

Marca: Shimadzu, Modelo: RF 5301.

Fuente: 150W Xenon lamp. Wavelength scale: 220-990nm. Measuring wavelength range: 220-750nm and 0 order as standard. 220-900nm with the optional R928 photomultiplier.

 

 Aplicaciones

 

Identificación de compuestos orgánicos e iones inorgánicos; cuantificación de componentes traza. Control de calidad de materias primas y productos finales; estudios de metabolismo de drogas; monitoreo de contaminantes en agua y alimentos.

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